PCR ትንታኔ መላ ፍለጋ መላ ፍለጋ: በተደጋጋሚ የሚጠየቁ ጥያቄዎች እና መፍትሄዎች

የፖሊሚኒስ ሰንሰለት ምላሽ (PCR) ትንታኔዎች በሞለኪዩላር ባዮሎጂ ውስጥ አስፈላጊ መሳሪያዎች ናቸው, ተመራማሪዎች ከጄኔታዊ ምርምር እስከ ክሊኒካዊ ምርመራዎች ለሚሰጡት መተግበሪያዎች ዲ ኤን ኤዎች እንዲወስኑ በመፍቀድ. ሆኖም እንደ ማንኛውም የተወሳሰበ መሣሪያ, የ PCR ትንታኔ አፈታሪያ በአፈፃፀም ላይ ተጽዕኖ የሚያሳድሩ ችግሮች ሊያጋጥሟቸው ይችላሉ. ይህ ጽሑፍ አንዳንድ የተለመዱ ጥያቄዎችን ያብራራልPCR ትንታኔየተለመዱ ችግሮች ተግባራዊ መፍትሄዎችን መቋቋም እና ይሰጣል.

1. የእኔ PCR ግብረ ሰዶማዊነት ለምን አያስተጓጉል?

በተጠቀሱት በጣም የተለመዱ ችግሮች አንዱ ዋናውን የ PCR ግብረመልስ ለማግኘት የ PCR ግብረመልስ አለመቻል ነው. ይህ በብዙ ምክንያቶች ሊገለጽ ይችላል-

ትክክል ያልሆነ የመጀመሪያ ንድፍ: - ምርቶችዎ ለ target ላማ ቅደም ተከተሎች የተወሰኑ መሆናቸውን ያረጋግጡ እና ጥሩ የመለዋወጥ ሙቀት (ቲኤም). የኒውነስ ዲዛይን ዋና መሳሪያዎችን የኒውቪስ ዲዛይን ይጠቀሙ.

በቂ ያልሆነ አብነት ዲ ኤን ኤ: - በቂ የሆነ አብነት ዲ ኤን ኤ እየተጠቀሙ መሆኑን ያረጋግጡ. በጣም ትንሽም ደካማ ወይም አሽነግም ያስገኛል.

በናሙናው ውስጥ መከለክቶች-በናሙና ውስጥ ያሉ ብቃቶች የ PCR ምላሽን ሊከለክሉ ይችላሉ. ዲ ኤን ኤን ለማፅዳት ወይም የተለየ የማስወገጃ ዘዴን በመጠቀም ያስቡ.

መፍትሔው: - የዋና ዲዛይንዎን ይፈትሹ, አብነት ትኩረትን ያሳድጉ, እና ናሙናዎን መከላከልዎን የያዘ መሆኑን ያረጋግጡ.

2. የእኔ PCRCRE ምርት የተሳሳተ መጠን ለምን ነው?

የእርስዎ PCRE ምርት መጠኑ እንደተጠበቀው ካልተፈለገ, በምላሽ ሁኔታዎች ወይም ንጥረነገሮች ጥቅም ላይ የዋሉ ችግሩን ሊያመለክት ይችላል.

የተለየ ያልሆነ ማጉያ-ይህ አንድ ፕሪሚየር ካልተቀነሰ ጣቢያ ጋር ቢገናኝ ሊከሰት ይችላል. እንደ ፍንዳታ ያሉ የመሣሪያዎቹን ልዩነት ይመልከቱ.

የተሳሳተ የሙቀት መጠን-የአስተዳደሩ የሙቀት መጠን በጣም ዝቅተኛ ከሆነ የተለየ ያልተሰጠ ውል ሊያስከትል ይችላል. በቀድሞው በተካሄደ የሙቀት መጠን የመያዝ ማመቻቸት.

መፍትሔው: - የአውራጃ ልዩነትን ያረጋግጡ እና የ PCR ምርቶችን ትክክለኛነት ለማሻሻል የአስተዳዳሪ ሙቀትን ያሻሽሉ.

3. የእኔ PCRICT ትንታኔ የስህተት መልእክት ያሳያል. ምን ማድረግ ነው የሚገባኝ፧

በ PCRA ላይ የስህተት መልእክቶች አስደንጋጭ ሊሆኑ ይችላሉ, ግን ብዙውን ጊዜ ሊሆኑ የሚችሉ ችግሮች ሊኖሩ ይችላሉ.

የመለኪያ ጉዳዮች: - PCR ትንታኔ በትክክል እንደተስተካከለ ያረጋግጡ. መደበኛ የጥገና እና የመለኪያ ቼኮች ትክክለኛ ውጤቶችን ለማግኘት ወሳኝ ናቸው.

የሶፍትዌር ቡድን አንዳንድ ጊዜ የሶፍትዌር ሳንካዎች ችግሮችን ያስከትላሉ. ኮምፒተርዎን እንደገና ያስጀምሩ እና የሶፍትዌር ዝመናዎችን ይመልከቱ.

መፍትሄ: - ለተለየ የስህተት ኮድ የተጠቃሚውን መመሪያ ይመልከቱ እና የሚመከሩ የማይመሪያ እርምጃዎችን ይከተሉ. መደበኛ ጥገና ብዙ ችግሮችን ሊከላከል ይችላል.

4. የእኔ PCR ግብረመልስ ለምን ወጥነት የለውም?

ወጥነት የሌለው የ PCR ውጤቶች በብዙ ምክንያቶች ሊበሳጭ ይችላል-

የመድኃኒት ጥራት-ኢንዛይሞችን, ግልገሎችን እና Dntps ን ጨምሮ ሁሉም መጎኖች አዲስ እና ከፍተኛ ጥራት ያላቸውን መሆናቸውን ያረጋግጡ. ጊዜ ያለፈባቸው ወይም የተበከሉ መጫዎቻዎች ተለዋዋጭነት ሊኖራቸው ይችላል.

የሙቀት ሳይክለር መለካት: - ተስማሚ የሙቀት ቅንጅቶች በ PCR ሂደት ላይ ተጽዕኖ ሊያሳድሩ ይችላሉ. የሙቀትዎ ሳይክለር መለካት በመደበኛነት ይፈትሹ.

መፍትሄ: - ወጥነት ያላቸውን ውጤቶች ለማረጋገጥ ከፍተኛ ጥራት ያላቸውን ድጋፎች ይጠቀሙ እና በመደበኛነት የሙቀትዎ ሳይክዎን በመደበኛነት ይጠቀሙ.

5. የ PCRE ምላሽን ውጤታማነት ማሻሻል የሚቻለው እንዴት ነው?

የ PCR ግብረመልሶችን ውጤታማነት ማሻሻል ወደ ከፍተኛ ምርት እና የበለጠ አስተማማኝ ውጤቶች ሊመሩ ይችላሉ.

የምላሽ ሁኔታዎችን ያሻሽሉ-የተለያዩ የቀደመውን የወቅቶች ዲ ኤን ኤ እና MGCL2 ን በመጠቀም ሙከራ ያድርጉ. እያንዳንዱ PCR ምላሽ ለተሻለ አፈፃፀም ልዩ ሁኔታዎችን ሊያስፈልግ ይችላል.

ከፍተኛ-ተህዋሽያን ኢንዛይሞች ይጠቀሙ-ትክክለኛነት ወሳኝ ከሆነ, በማቆሙ ጊዜ ስህተቶችን ለመቀነስ ከፍተኛ ጥራት ያለው ዲ ኤን ኤ ፖሊሜኔሽን በመጠቀም.

መፍትሄ: - ለተለዩ PCR Setuctup ማዋቀር ምርጥ ሁኔታዎችን ለማግኘት ማመቻቸት ሙከራ ያከናውኑ.

ማጠቃለያ

መላ ፍለጋ ሀPCR ትንታኔአስደንጋጭ ሥራ ሊሆን ይችላል, ግን የተለመዱ ጉዳዮችን መረዳት እና መፍትሄዎቻቸውም የእርስዎን PCR ተሞክሮ በእጅጉ ሊያሻሽሉ ይችላሉ. ተመራማሪዎች እነዚህን የተለመዱ ችግሮች በመፍታት PCRR ውጤቶችን ማሻሻል እና ሞለኪውላዊ ባዮሎጂ ማመልከቻዎች አስተማማኝ ውጤቶችን ማረጋገጥ ይችላሉ. መደበኛ ጥገና, ጥንቃቄ የተሞላባቸው ተጓዳኝ ምርጫዎች, እና የምላሽ ሁኔታ ማመቻቸት ለተሳካ PCR ትንተና ቁልፍ ናቸው.