የበጋ ሳይንስ መመሪያ፡ የ 40 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የሙቀት ሞገድ የሞለኪውላር ሙከራዎችን ሲያሟላ

ከፍተኛ ሙቀት ከቅርብ ጊዜ ወዲህ በአብዛኞቹ ቻይናዎች ቀጥሏል። በጁላይ 24፣ የሻንዶንግ ግዛት የሚቲዎሮሎጂ ታዛቢዎች ቢጫ ከፍተኛ ሙቀት ማንቂያ አውጥቷል፣ “ሳውና የሚመስል” የሙቀት መጠን ከ35-37°C (111-133°F) እና 80% የእርጥበት መጠን ለቀጣዮቹ አራት ቀናት በመሬት ውስጥ አካባቢዎች። እንደ ቱርፓን፣ ዢንጂያንግ ባሉ ቦታዎች ያለው የሙቀት መጠን ወደ 48°ሴ (111-133°F) እየተቃረበ ነው። Wuhan እና Xiaogan, Hube, በብርቱካናማ ማስጠንቀቂያ ስር ናቸው, በአንዳንድ አካባቢዎች የሙቀት መጠኑ ከ 37 ° ሴ. በዚህ የሚያቃጥል ሙቀት፣ በፓይፕትስ ወለል በታች ያለው በአጉሊ መነጽር የሚታይ ዓለም ያልተለመደ ረብሻ እያጋጠመው ነው—የኑክሊክ አሲዶች መረጋጋት፣ የኢንዛይሞች እንቅስቃሴ እና የሪኤጀንቶች አካላዊ ሁኔታ ሁሉም በጸጥታ በሙቀት ማዕበል የተዛቡ ናቸው።

ኑክሊክ አሲድ ማውጣት ከጊዜ ጋር የሚደረግ ውድድር ሆኗል። የውጪው ሙቀት ከ 40 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ሲበልጥ, የአየር ማቀዝቀዣው ቢበራም, የአሠራር ጠረጴዛው የሙቀት መጠን ብዙውን ጊዜ ከ 28 ° ሴ በላይ ያንዣብባል. በዚህ ጊዜ፣ የአር ኤን ኤ ናሙናዎች በክፍት ቦታው ውስጥ የሚቀሩት በፀደይ እና በመጸው ወራት ከነበረው እጥፍ በበለጠ ፍጥነት ይቀንሳል። በመግነጢሳዊ ዶቃ አወጣጥ ውስጥ፣ በተፋጠነ የሟሟ ተለዋዋጭነት ምክንያት የመጠባበቂያው መፍትሄ በአካባቢው ይሞላል፣ እና ክሪስታሎች በቀላሉ ይጣላሉ። እነዚህ ክሪስታሎች በኒውክሊክ አሲድ የመያዝ ቅልጥፍና ላይ ትልቅ መለዋወጥ ያስከትላሉ። የኦርጋኒክ መሟሟት ተለዋዋጭነት በአንድ ጊዜ ይጨምራል. በ 30 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ የክሎሮፎርም ተለዋዋጭነት መጠን ከ 25 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ጋር ሲነፃፀር በ 40% ይጨምራል. በሚሠራበት ጊዜ በጢስ ማውጫ ውስጥ ያለው የንፋስ ፍጥነት 0.5 ሜትር / ሰ መሆኑን ማረጋገጥ አስፈላጊ ነው, እና የመከላከያ ውጤታማነትን ለመጠበቅ የኒትሪል ጓንቶችን ይጠቀሙ.

PCR ሙከራዎች የበለጠ ውስብስብ የሙቀት መዛባት ያጋጥማቸዋል። እንደ Taq ኢንዛይም እና ሪቨርስ ትራንስክሪፕትሴስ ያሉ ሬጀንቶች ለድንገተኛ የሙቀት መጠን መለዋወጥ በጣም ስሜታዊ ናቸው። ከ -20 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ማቀዝቀዣ ውስጥ ከተወገደ በኋላ በቧንቧ ግድግዳዎች ላይ ያለው ንፅፅር ወደ ምላሽ ስርአት ውስጥ ከገባ ከ 15% በላይ የኢንዛይም እንቅስቃሴን ያስከትላል. የዲኤንቲፒ መፍትሄዎች ለክፍል ሙቀት (>30°C) ለ5 ደቂቃ ብቻ ከተጋለጡ በኋላ ሊታወቅ የሚችል ብልሽት ሊያሳዩ ይችላሉ። የመሳሪያዎች አሠራር በከፍተኛ ሙቀትም ተስተጓጉሏል. የላቦራቶሪ የአየር ሙቀት መጠን> 35 ° ሴ ሲሆን እና የ PCR መሳሪያው የሙቀት ማስተላለፊያ ክፍተት በቂ ካልሆነ (ከግድግዳው ከ<50 ሴ.ሜ) የውስጥ ሙቀት ልዩነት እስከ 0.8 ° ሴ ሊደርስ ይችላል. ይህ መዛባት በ96-ጉድጓድ ሳህን ጠርዝ ላይ የማጉላት ቅልጥፍናን ከ40 በመቶ በላይ እንዲቀንስ ሊያደርግ ይችላል። የአቧራ ማጣሪያዎች በመደበኛነት ማጽዳት አለባቸው (የአቧራ ክምችት የሙቀት ማባከን ውጤታማነትን በ 50% ይቀንሳል) እና ቀጥተኛ አየር ማቀዝቀዣን ማስወገድ ያስፈልጋል. በተጨማሪም፣ የ PCR ሙከራዎችን በአንድ ጀምበር ስታካሂዱ፣ ናሙናዎችን ለማከማቸት PCR መሳሪያውን እንደ “መቀየሪያ ማቀዝቀዣ” ከመጠቀም ይቆጠቡ። በ 4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ከ 2 ሰአታት በላይ ማከማቸት የተሞቀው ክዳን ከተዘጋ በኋላ ጤዛ እንዲፈጠር ሊያደርግ ይችላል, ይህም የምላሽ ስርዓቱን በማደብዘዝ እና የመሳሪያውን የብረት ሞጁሎች ሊበላሽ ይችላል.

የማያቋርጥ ከፍተኛ ሙቀት ማስጠንቀቂያዎች ሲገጥሟቸው፣ሞለኪውላር ላቦራቶሪዎችም ማንቂያውን ማሰማት አለባቸው። ውድ የሆኑ የአር ኤን ኤ ናሙናዎች በ -80°C ማቀዝቀዣ ውስጥ መቀመጥ አለባቸው፣ መዳረሻው ለከፍተኛ ሙቀት ጊዜዎች የተገደበ ነው። በቀን ከአምስት ጊዜ በላይ የ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ማቀዝቀዣ በር መክፈት የሙቀት መለዋወጥን ያባብሳል. ከፍተኛ ሙቀት-አምጪ መሳሪያዎች በሁለቱም በኩል እና ከኋላ በኩል ቢያንስ 50 ሴ.ሜ የሙቀት ማስተላለፊያ ቦታ ያስፈልጋቸዋል. በተጨማሪም የሙከራ ጊዜን እንደገና ለማዋቀር ይመከራል: 7:00-10:00 AM ለሙቀት-ነክ ስራዎች እንደ አር ኤን ኤ ማውጣት እና qPCR ጭነት; 1፡00-4፡00 ፒኤም ለሙከራ ላልሆነ ስራ ለምሳሌ ዳታ ትንተና። ይህ ስልት ከፍተኛ የሙቀት መጠን ያላቸውን ወሳኝ ደረጃዎች ውስጥ ጣልቃ እንዳይገባ ውጤታማ በሆነ መንገድ ይከላከላል.

በሙቀት ማዕበል ወቅት የሚደረጉ ሞለኪውላዊ ሙከራዎች የሁለቱም ቴክኒኮች እና ትዕግስት ፈተናዎች ናቸው። ፋታ በሌለው የበጋ ጸሀይ ስር ምናልባት መሳሪያውን የበለጠ ሙቀት እንዲያጠፋ ለማድረግ ፒፕትዎን ለማስቀመጥ እና በናሙናዎችዎ ላይ ተጨማሪ የበረዶ ሳጥን ለመጨመር ጊዜው አሁን ነው። ይህ ለሙቀት መለዋወጥ ያለው አክብሮት በበጋው ወራት በጣም ውድ የሆነው የላብራቶሪ ጥራት ነው - ከሁሉም በላይ በበጋው 40 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ሙቀት ውስጥ ሞለኪውሎች እንኳን በጥንቃቄ የተጠበቀ "ሰው ሰራሽ ዋልታ ክልል" ያስፈልጋቸዋል.