የበጋ የሳይንስ መመሪያ፡ የ40°ሴ የሙቀት ሞገድ ሞለኪውላዊ ሙከራዎችን ሲያሟላ

በቅርቡ በቻይና አብዛኛው ክፍል ከፍተኛ የሙቀት መጠን ቀጥሏል። ሐምሌ 24 ቀን፣ የሻንዶንግ የክልል ሜትሮሎጂ ኦብዘርቫቶሪ ቢጫ ከፍተኛ የሙቀት መጠን ማስጠንቀቂያ አውጥቶ ለቀጣዮቹ አራት ቀናት "ሳውና መሰል" የሙቀት መጠን ከ35-37°ሴ (111-133°ፋ) እና 80% እርጥበት እንደሚኖር ተንብዮአል። እንደ ቱርፓን፣ ዚንጂያንግ ባሉ ቦታዎች የሙቀት መጠን ወደ 48°ሴ (111-133°ፋ) እየተቃረበ ነው። ዉሃን እና ዢያጎጋን፣ ሁቤይ፣ በአንዳንድ አካባቢዎች የሙቀት መጠኑ ከ37°ሴ በላይ በሆነ ብርቱካናማ ማንቂያ ስር ናቸው። በዚህ በሚነድ ሙቀት፣ ከፓይፔቶች ወለል በታች ያለው ጥቃቅን ዓለም ያልተለመደ ረብሻ እያጋጠመው ነው - የኒውክሊክ አሲዶች መረጋጋት፣ የኢንዛይሞች እንቅስቃሴ እና የሬጀንቶች አካላዊ ሁኔታ ሁሉም በሙቀት ማዕበል በጸጥታ የተዛቡ ናቸው።

የኒውክሊክ አሲድ ማውጣት ከጊዜ ጋር የሚወዳደር ውድድር ሆኗል። የውጪው የሙቀት መጠን ከ40°ሴ ሲበልጥ፣ የአየር ማቀዝቀዣው በርቶም ቢሆን፣ የአሠራር ጠረጴዛው የሙቀት መጠን ብዙውን ጊዜ ከ28°ሴ በላይ ያርፋል። በዚህ ጊዜ፣ በክፍት ቦታ ላይ የሚቀሩት የአር ኤን ኤ ናሙናዎች በጸደይ እና በመኸር ወቅት ከሚከሰቱት በእጥፍ በላይ በፍጥነት ይበላሻሉ። በማግኔቲክ ዶድ ማውጣት፣ የቋት መፍትሄው በሟሟው ፈጣን ፍጥነት ምክንያት በአካባቢው ይሞላል፣ እና ክሪስታሎች በቀላሉ ይመነጫሉ። እነዚህ ክሪስታሎች የኒውክሊክ አሲድ መያዝ ውጤታማነት ላይ ከፍተኛ መለዋወጥ ያስከትላሉ። የኦርጋኒክ መሟሟቶች ተለዋዋጭነት በአንድ ጊዜ ይጨምራል። በ30°ሴ፣ የክሎሮፎርም ቮልቲላይዜሽን መጠን ከ25°ሴ ጋር ሲነጻጸር በ40% ይጨምራል። በሚሠራበት ጊዜ፣ በጭስ ማውጫው ውስጥ ያለው የንፋስ ፍጥነት 0.5ሜ/ሰ መሆኑን ማረጋገጥ እና የመከላከያ ውጤታማነትን ለመጠበቅ የናይትሪል ጓንቶችን መጠቀም ያስፈልጋል።

የPCR ሙከራዎች የበለጠ ውስብስብ የሙቀት መዛባት ያጋጥማቸዋል። እንደ Taq ኢንዛይም እና የተገላቢጦሽ ትራንስክሪፕቴዝ ያሉ ሬጀንቶች ለድንገተኛ የሙቀት መለዋወጥ በጣም ስሜታዊ ናቸው። ከ -20°ሴ ማቀዝቀዣ ከተወገዱ በኋላ በቱቦው ግድግዳዎች ላይ ያለው ጤዛ ወደ ምላሽ ስርዓቱ ከገባ ከ15% በላይ የኢንዛይም እንቅስቃሴ መጥፋት ሊያስከትል ይችላል። የdNTP መፍትሄዎች ለ5 ደቂቃዎች ብቻ ለክፍል ሙቀት (>30°ሴ) ከተጋለጡ በኋላ ሊታወቅ የሚችል መበስበስን ሊያሳዩ ይችላሉ። የመሳሪያው አሠራር በከፍተኛ ሙቀትም ይስተጓጎላል። የላቦራቶሪ አካባቢ የሙቀት መጠን >35°ሴ ሲሆን እና የPCR መሳሪያው የሙቀት መለቀቅ ማጽዳት በቂ ካልሆነ (ከግድግዳው <50 ሴ.ሜ)፣ የውስጥ የሙቀት ልዩነት እስከ 0.8°ሴ ሊደርስ ይችላል። ይህ ልዩነት በ96 ጉድጓድ ሳህን ጠርዝ ላይ የማጉላት ቅልጥፍናን ከ40% በላይ እንዲቀንስ ሊያደርግ ይችላል። የአቧራ ማጣሪያዎች በየጊዜው ማጽዳት አለባቸው (የአቧራ ክምችት የሙቀት መሟጠጥን ውጤታማነት በ50% ይቀንሳል)፣ እና ቀጥተኛ የአየር ማቀዝቀዣ መወገድ አለባቸው። በተጨማሪም፣ በአንድ ሌሊት የPCR ሙከራዎችን ሲያካሂዱ፣ ናሙናዎችን ለማከማቸት የPCR መሳሪያን እንደ "ጊዜያዊ ማቀዝቀዣ" ከመጠቀም ይቆጠቡ። ከ2 ሰዓታት በላይ በ4°ሴ የሙቀት መጠን ማከማቸት የሞቀው ክዳን ከተዘጋ በኋላ ጤዛ እንዲፈጠር ሊያደርግ ይችላል፣ የምላሽ ስርዓቱን ሊቀንስ እና የመሳሪያውን የብረት ሞጁሎች ሊያበላሽ ይችላል።

የማያቋርጥ ከፍተኛ የሙቀት መጠን ማስጠንቀቂያዎች ሲገጥሟቸው፣ የሞለኪውላር ላቦራቶሪዎችም ማንቂያውን ማሰማት አለባቸው። ውድ የሆኑ የአር ኤን ኤ ናሙናዎች በ-80°ሴ ማቀዝቀዣ ጀርባ መቀመጥ አለባቸው፣ መዳረሻቸውም ለከፍተኛ የሙቀት መጠን ጊዜያት የተገደበ መሆን አለበት። የ-20°ሴ ማቀዝቀዣን በር በቀን ከአምስት ጊዜ በላይ መክፈት የሙቀት መለዋወጥን ያባብሰዋል። ከፍተኛ ሙቀት የሚያመነጩ መሳሪያዎች በሁለቱም በኩል እና ከኋላ በኩል ቢያንስ 50 ሴ.ሜ የሙቀት ማሰራጫ ቦታ ያስፈልጋቸዋል። በተጨማሪም፣ የሙከራ ጊዜን እንደገና ማዋቀር ይመከራል፡ እንደ አር ኤን ኤ ማውጣት እና የ qPCR ጭነት ላሉ የሙቀት መጠን ስሜታዊ ስራዎች ከ 7:00-10:00 ጥዋት፤ እንደ የውሂብ ትንተና ላሉ የሙከራ ያልሆኑ ስራዎች ከ 1:00-4:00 ከሰዓት። ይህ ስትራቴጂ ከፍተኛ የሙቀት መጠን ጫፎች ወሳኝ እርምጃዎችን እንዳያስተጓጉሉ ውጤታማ በሆነ መንገድ ይከላከላል።

በሙቀት ሞገድ ወቅት የሞለኪውላር ሙከራዎች የቴክኒክም ሆነ የትዕግስት ፈተና ናቸው። በማያቋርጠው የበጋ ፀሐይ ስር፣ ምናልባት ፒፔትዎን አውርደው ተጨማሪ የበረዶ ሳጥን ወደ ናሙናዎችዎ ለመጨመር ጊዜው አሁን ሊሆን ይችላል፣ ይህም መሳሪያው ተጨማሪ ሙቀትን እንዲያጠፋ ያስችለዋል። ይህ ለሙቀት መለዋወጥ ያለው አክብሮት በበጋ ወራት በጣም ውድ የሆነው የላብራቶሪ ጥራት ነው - ከሁሉም በላይ፣ በበጋ ወቅት በ40°ሴ ሙቀት፣ ሞለኪውሎች እንኳን በጥንቃቄ የተጠበቀ "አርቲፊሻል የዋልታ ክልል" ያስፈልጋቸዋል።